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ELISA檢測試劑盒在處理和保存方面要考慮哪幾個方面

更新日期: 2019-04-15
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   ELISA檢測試劑盒通常,酶聯免疫反應曲線是規則的,如果曲線不規則說明實驗穩定性差,宜做平行樣修正。做三平行樣取中間值,也可做雙平行樣,取算術平均值,但做雙平行樣時兩個樣本檢測值相差>20%時宜將該數值全部刪除。在ELISA檢測試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標本,加酶聯系物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行產生氣泡。加標本通常用微量加樣器,按規則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴,避免發作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
 
  ELISA檢測試劑盒在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:
 
  (1)要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA檢測試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
 
  (2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。
 
  (3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
 
  (4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
 
  (5)標本在保存中如出現細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
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