細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。（由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系），因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞（特定環(huán)境下口語(yǔ)和書(shū)面語(yǔ)都使用），廣義是指可傳代的細(xì)胞。經(jīng)過(guò)40-50次分裂的渡過(guò)第二次死亡危機(jī)的細(xì)胞，稱(chēng)之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限，則稱(chēng)之為有限細(xì)胞系；已獲無(wú)限繁殖能力的細(xì)胞系，稱(chēng)連續(xù)或無(wú)限細(xì)胞系。無(wú)限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，可能成為惡性細(xì)胞，因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無(wú)限細(xì)胞系有永生性（不死性），但仍保留接觸抑制和無(wú)異體接種致死；有的有永生性，異體接種有致瘤性，說(shuō)明已惡性化。由某一細(xì)胞系分離出來(lái)的、在性狀上與原細(xì)胞系不同的細(xì)胞系，稱(chēng)亞系。
原組織中含有多種類(lèi)型的異質(zhì)性細(xì)胞，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)條件選擇，細(xì)胞已趨于均一，這些細(xì)胞群體可在體外繼續(xù)增殖和成為某一種種系的細(xì)胞群體。因此，原代培養(yǎng)是否成功對(duì)于建成細(xì)胞系是至關(guān)重要的階段。原代培養(yǎng)成功的關(guān)鍵與以下因素有關(guān)：
一、選擇合適的原代培養(yǎng)方法
組織塊、酶消化和機(jī)械分離三種方法，各有優(yōu)缺點(diǎn)。酶消化法可以獲得大量的活細(xì)胞．直接培養(yǎng)細(xì)胞形成單層，建立細(xì)胞系較快速，成功率較高。胰蛋白酶是常用的方法，用于分離組織和常規(guī)傳代，但胰蛋白酶可能損傷細(xì)胞。膠原酶對(duì)細(xì)胞間質(zhì)有很好的作用，因此對(duì)消化含膠原組織豐富的正常上皮組織和癌組織效果好，對(duì)上皮細(xì)胞損傷小。組織塊法取材組織量小，當(dāng)不能用其他方法時(shí)可用。機(jī)械分離方法可快速獲取細(xì)胞，但間質(zhì)細(xì)胞多，對(duì)細(xì)胞損傷大，因此，根據(jù)組織來(lái)源和培養(yǎng)目的選擇方法。
二、選擇合適的培養(yǎng)條件
原代培養(yǎng)的組織含有多種類(lèi)型的細(xì)胞，要促進(jìn)所需要的細(xì)胞增殖，抑制混雜細(xì)胞生長(zhǎng)，可按照細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)要求，選擇合適的培養(yǎng)基。如果要建立上皮細(xì)胞系，由于纖維細(xì)胞在體外比上皮細(xì)胞更易于生長(zhǎng)，因此，限制培養(yǎng)基中血清濃度和加人可刺激上皮細(xì)胞生長(zhǎng)的必要成分，可以促進(jìn)上皮細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制纖維細(xì)胞生長(zhǎng)。
三、精心呵護(hù)細(xì)胞，適時(shí)傳代和換液
傳代時(shí)，酶消化細(xì)胞要適時(shí)，及時(shí)換液保持培養(yǎng)液恒定的pH值。避免由于污染或培養(yǎng)中不慎事故，使細(xì)胞毀于一旦。要及時(shí)從低代的細(xì)胞開(kāi)始凍存，適時(shí)復(fù)蘇細(xì)胞，防止傳代細(xì)胞中斷。
